培養(yǎng)基真空干燥和操作方法！

時(shí)間：2019-04-17作者：北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司瀏覽：94

培養(yǎng)基真空干燥和操作方法！ 
培養(yǎng)基真空干燥和操作方法！百歐博偉生物

⒈斜面保藏法將菌種轉(zhuǎn)接在適宜固體斜面培養(yǎng)基上,待其充分生長后,用牛皮紙將棉塞部分包扎好（棉塞換成膠塞效果較好）,置4C冰箱中包藏.保藏時(shí)間依微生物的種類而定.霉菌,放線菌及芽孢菌保存2-4個(gè)月移種一次,酵母菌間隔兩個(gè)月,普通細(xì)菌一個(gè)月,假單胞菌兩周傳代一次.此法優(yōu)點(diǎn)是操作簡單,使用方便,缺點(diǎn)是保藏時(shí)間短,易被污染. 

⒉液體石蠟保藏法將無菌石蠟加在已長好菌的斜面上,其用量以高出斜面*1CM為準(zhǔn),使菌種與空氣隔絕.將試管直立,置低溫或室溫下保存.此法實(shí)用且效果較好.霉菌,放線菌,芽孢菌可保藏兩年以上,酵母菌可保藏1-2年,普通細(xì)菌也可保藏1年左右. 

⒊穿刺保藏法按穿刺接種方式培養(yǎng)菌種,菌種長好后用膠塞封嚴(yán),置4冰箱存放. 

⒋砂土管保藏法
（1）河砂處理取河砂若干加入鹽酸10%,加熱煮沸30min除去**機(jī)質(zhì).倒去鹽酸溶液,用自來水沖洗至中性,zui后一次用蒸鎦水沖洗,烘干后用40目篩子過篩,棄去粗顆粒,備用。
（2）土壤處理取非耕作層不含腐殖質(zhì)的痩黃土或紅土,加自來水浸泡洗滌數(shù)次,直至中性.烘干后碾碎,用100目篩子過篩,粗顆粒部分丟掉。
（3）砂土混合處理妥當(dāng)?shù)暮由芭c土壤按3:1的比例摻合（或根據(jù)需要而用其他比例,甚至可全部作砂或土）均勻后,裝入10x100mm的小試管或安瓿管中,每管分裝1g左右,塞上棉塞,進(jìn)行滅菌（通常采用間歇滅菌2--3次）,最后烘干。
（4）無菌檢查每10支砂土管隨機(jī)抽1支,將砂土倒入肉湯培養(yǎng)基中,30培養(yǎng)40h,若發(fā)現(xiàn)有微生物生長,所有砂土管則需重新滅菌,再作無菌試驗(yàn),直至證明無菌后方可使用。
（5）菌懸液的制備取生長健壯的新鮮斜面菌種,加入2-3ml無菌水（每18x180mm的試管斜面菌種）,用接種環(huán)輕輕將菌苔洗下,制成菌懸液。
（6）分裝樣品每支砂土管（注明標(biāo)記后）加入0.5ml菌懸液（剛剛使砂土潤濕為宜）,用接種針拌勻。
（7）干燥將裝有菌懸液的砂土管放入干燥器內(nèi),干燥器底部盛有干燥劑.用真空泵抽干水分后火焰封口（也可用橡皮塞或棉塞塞住試管口）。
（8）保存置4冰箱或室溫干燥處,每隔一定的時(shí)間進(jìn)行檢測.此法多用于產(chǎn)芽孢的細(xì)菌,產(chǎn)生孢子的霉菌和放線菌.在抗生素工業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用廣泛,效果較好,可保存幾年時(shí)間,但對營養(yǎng)細(xì)胞效果不佳。

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