冠狀病毒檢測技術(shù)介紹

時間：2022-06-24作者：廣東省華微檢測股份有限公司瀏覽：253

冠狀病毒檢測技術(shù)介紹

新冠狀病毒（2019-nCoV）檢測目前只有熒光定量PCR方法和測序方法兩種被認可的方法。測序不具備快速篩查潛力，這里不做討論。目前國家藥監(jiān)局審批通過的都是熒光定量PCR的試劑盒。等溫擴增的檢劑盒，至少已有兩個單位開發(fā)成功，有望近幾天上市。等溫擴增的試劑盒上市后，檢測速度會大幅提升，檢測過程只需要15分鐘左右?；究梢詽M足當下疫情控制要求。



【說明】：鑒于當前技術(shù)進步非?？焖?，這里的信息隨時可能會發(fā)生變化，請謹慎參考。


對抗當前的疫情，快速檢測方法的可以快速確診病人，快速隔離，快速采取措施。因此，各家科研機構(gòu)以及相關的企業(yè)，特別是體外診斷企業(yè)、、大學、研究所以及疾控系統(tǒng)等，在這次新冠狀病毒的檢測產(chǎn)品開發(fā)中，扮演了重要的角色。這里簡要介紹一下新冠狀病毒的檢測技術(shù)以及檢測產(chǎn)品的開 ** 況。最后，也會給出個人的一點建議，希望對產(chǎn)品開發(fā)，以及基金申請選題有所幫助。


一、新冠狀病毒相關檢測技術(shù)


世界衛(wèi)生組織及國家推薦的檢測方法是檢測病毒的基因，通過熒光定量RT-qPCR的方法或者是基因測序的方法(1)。其它的方法很難達到實際檢測所要求的靈敏度，這里基本不予考慮。測序方法由于比較慢，價格也比較昂貴，適合從事研究但不適合作為篩查手段。檢測核酸的方法中，由于這次的新冠狀病毒是RNA病毒，所以需要加入一步反轉(zhuǎn)錄的過程，再進行PCR擴增。目前的檢測方法有熒光定量PCR方法和等溫擴增的方法，還有數(shù)字PCR技術(shù)以及基于試紙檢測的方法。還有一些研究的目標是加快樣品前處理，提升檢測通量，提升檢測自動化水平，以及降低對設備的要求，對檢測人員的要求和降低成本。目前試劑盒檢測的標本主要是咽拭子、痰液、肺泡灌洗液、血清及血漿等。


1、 常規(guī)熒光定量PCR方法。目前上市的試劑盒都是基于核酸檢測的。較早上市的華大基因的方法，采用單基因檢測，前后大約需要3小時。后來，的產(chǎn)品有了一些改進，如多基因檢測，或者使用適合快速擴增的酶，都在一定程度上可以提升檢測速度。2020年1月28日，*二批獲得藥監(jiān)局批準的試劑盒中，圣湘生物采用了*創(chuàng)的RNA一步法技術(shù)，靈敏度為200copies/mL，樣本處理與擴增檢測在一個PCR反應管中即可完成，較大程度減少生物安全風險和交叉污染，可以在30分鐘給出結(jié)果，這應該是這種方法的極限。而且應該沒計算樣品處理的時間(2)。


2、 等溫擴增法：從原理上講，等溫擴增是較快且靈敏的方法。該方法也是檢測病毒的核酸，只是信號放大的策略不同，只需要一個溫度就可以了，不需要像常規(guī)PCR那樣，需要在2~3個不同的溫度之間進行循環(huán)。等溫擴增減少了升降溫，反應時間要比常規(guī)的PCR快很多，只需要十幾分鐘。但是，基于這種技術(shù)的試劑盒開發(fā)要比常規(guī)Q-PCR試劑盒復雜一些，涉及多對引物，所以截至今天還沒有正式上市的產(chǎn)品。但至少有兩個團隊已經(jīng)完成產(chǎn)品開發(fā)。


3、 試紙條法（膠體金*層析法）：該方法快速方便，優(yōu)點適合快速篩選，*，不依賴儀器。在病毒濃度低的時候，會導致漏檢，獲得國家藥監(jiān)局批準的可能性較小。


4、 樣品前處理及檢測自動化：除了在檢測環(huán)節(jié)提升檢測效率之外，縮短樣品前處理時間，提升檢測通量，提升檢測自動化也是一個重要研究方向。


5、 輔助技術(shù)開發(fā)：如開發(fā)能降低檢測對環(huán)境要求的儀器或試劑。這次所有的檢測都必須在P2（二級生物安全實驗室）進行。這是一大限制因素，這種實驗室建設周期長，審批慢。不可能短時間建成，只能利用現(xiàn)有資源。這也是湖北省每天檢測能力受限的重要原因。因此，開發(fā)不依賴于P2實驗室的檢劑和方法，也是當前的一個重要方向。




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• 詞條

  詞條說明

• 柯薩奇病毒檢測服務

  柯薩奇病毒是一種腸病毒，分為A和B兩類，一般在夏秋季呈流行或散在發(fā)生，傳播途徑是經(jīng)消化道、呼吸道，亦可通過血行經(jīng)胎盤傳播給胎兒。病毒開始在腸道、上呼吸道的內(nèi)皮細胞和淋巴組織內(nèi) ** ，經(jīng)血行傳播，其親嗜性靶器官為**神經(jīng)系統(tǒng)，心臟、血管內(nèi)皮細胞、肝、胰、肺、生殖器官、骨骼肌、皮膚黏膜等。英文名稱：Coxsackie virus infection就診科室：內(nèi)科；兒科多發(fā)群體：柯薩奇病毒A型主要感染

• 【消毒器械檢測】

  消毒器械檢測參考標準：a)《消毒技術(shù)規(guī)范》2002版 2.1.1b)消毒劑衛(wèi)生標準GB 26372-2010c)二氧化氯消毒劑衛(wèi)生標準GB 26366-2010d)含碘消毒劑衛(wèi)生標準GB 26368-2010e)胍類消毒劑衛(wèi)生標準GB 26367-2010f)消毒劑衛(wèi)生標準GB 26373-2010h)過氧化物類消毒劑衛(wèi)生標準GB 26371-2010j)含溴消毒劑衛(wèi)生標準GB 26370-201

• 【病毒抑制率實驗】

  構(gòu)建方法一般是根據(jù)原始質(zhì)粒信息確定克隆方案，有以下兩種方法。1）如果原始質(zhì)粒與載體有匹配酶切位點，采用相應的內(nèi)切酶切下相應片段，回收并連接到載體，酶切，并測序鑒定。2）如果沒有匹配的酶切位點，則設計帶有特殊接頭的引物進行PCR擴增，得到目的片段，采用相應的內(nèi)切酶切下相應片段，回收并連接到穿梭載體，酶切，并測序鑒定。質(zhì)粒載體能夠進行自主復制的環(huán)狀DNA雙鏈結(jié)構(gòu)，包括真核生物的細胞器（主要指線粒體和葉

• 華微病毒滅活效果驗證

  廣東省華微檢測股份有限公司主要從事空氣凈化產(chǎn)品檢測、消毒產(chǎn)品檢測評價、潔凈室檢測、公共場所檢測評價、生產(chǎn)環(huán)境衛(wèi)生與分析、室內(nèi)環(huán)境檢測、抗菌防霉產(chǎn)品檢測、產(chǎn)品微生物污染分析與防治、水質(zhì)檢測、食品、藥品、化妝品等產(chǎn)品質(zhì)量檢測、微生物技術(shù)咨詢、人員培訓等業(yè)務。消毒產(chǎn)品病毒殺滅效果檢測，針對不同的消毒產(chǎn)品，用具有一定代表性的、活的病毒及其細胞感染技術(shù)，殺滅實驗方法不同。不同的病毒殺滅驗證，收費要求也會不同