恒溫恒濕培養(yǎng)箱如何測(cè)定水中土壤菌群

時(shí)間：2023-07-27作者：上海喆圖科學(xué)儀器有限公司瀏覽：22

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       一、測(cè)定過程

       1.水樣的收集

       2.用無菌采樣瓶收集被測(cè)樣品，在采樣過程中，要維護(hù)瓶口和瓶頸，避免這些部分受雜菌污染。瓶?jī)?nèi)要留下足夠的空間，以備測(cè)定之前搖晃。

       3.若收集的水中有余氯，應(yīng)于采樣前在無菌操作下于無菌采樣瓶中滅過菌的硫代，量為每升水樣約0.1g。

       4.水樣收集后應(yīng)立即進(jìn)行測(cè)定，如果2h內(nèi)不能進(jìn)行測(cè)定，應(yīng)把水樣放在冰箱中，于4℃~10℃保存，保存時(shí)刻不宜追趕24h。經(jīng)冷凍保存后的水樣需測(cè)守時(shí)，從冰箱中取出于30℃左右活化4h~5h，再進(jìn)行測(cè)定。

       5.無菌箱(室)，把試驗(yàn)所用的無菌稀釋水、無菌培育皿、無菌吸管等用品放人無菌箱(室)內(nèi)，打開紫外線燈30min。

       6.水樣的稀釋和接種，關(guān)掉紫外線燈，打開熒光燈，將待測(cè)水樣放人無菌箱(室)中，立即用75%的乙醇溶液浸泡的醫(yī)用脫脂棉球擦手，點(diǎn)著無菌箱(室)內(nèi)的酒精燈。

       二、以下對(duì)水樣的稀釋和接種條的操作應(yīng)在無菌箱(室)內(nèi)的火焰區(qū)進(jìn)行。

       1.選擇適合的稀釋度，應(yīng)使最后一個(gè)稀釋度接種后培育皿中生長(zhǎng)的菌落數(shù)小于300個(gè)，在空白稀釋水樣瓶上標(biāo)上稀釋度數(shù)。

       2.用10倍稀釋法稀釋水樣，即用5mL無菌吸管汲取5mL水樣注入到45mL空白稀釋水中充沛搖勻，此刻稀釋度為10-1.

       3.另取一支5mL無菌吸管汲取5mL10-1水樣移人到*二個(gè)稀釋水中，充沛搖勻，此刻稀釋度為10~2，順次類推，直至需求的稀釋度為止。

       4.將不同稀釋度的水樣分別接種到無菌培育皿中，每個(gè)稀釋度重復(fù)接種3~5個(gè)皿，每皿接種1mL，接種時(shí)左手掌托住培育皿，大拇指和食指輕輕將培育皿提起，吸管與培育皿底成45°角相接。移開吸管時(shí)吸管不宜再碰到培育皿。接種時(shí)刻不宜追趕4s。每接種一個(gè)稀釋度更換一支無菌吸管。另取一組培育皿不接水樣，作為空白。同時(shí)操作。

       5.將滅過菌的培育基冷卻至(45士1)℃，掀開培育皿蓋，將培育基灌入培育皿內(nèi)，每皿應(yīng)灌15mL~20mL。灌皿時(shí)不要使培育基直接灌在水樣上，灌皿后要將融化的培育基和皿中水樣*混合， 小心勿使混合液濺到培育皿的邊際， 測(cè)定一個(gè)水樣從接種到灌皿不得追趕20min。

       三、培育

       待培育皿中培育基固化后，倒置平皿，在恒溫恒濕培養(yǎng)箱中29℃培育72h。


上海喆圖科學(xué)儀器有限公司專注于培養(yǎng)箱,干燥箱,馬弗爐等

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