生物緩沖劑有很多類型,常用的如Tris、Bicine、鹽緩沖液等,在選擇緩沖劑的時(shí)候通常主要考慮的就是緩沖液的pH緩沖范圍和是否對(duì)實(shí)驗(yàn)體系產(chǎn)生干擾,其離子強(qiáng)度雖然影響不大,但這一些特定實(shí)驗(yàn)中還是不容忽視的。
嚴(yán)格來說同一種緩沖劑的離子強(qiáng)度不是固定的,與特定溫度壓強(qiáng)下的解離常數(shù)是定值不一樣,離子強(qiáng)度受緩沖液的濃度以及緩沖比的影響。比如Bicine緩沖劑,其離子強(qiáng)度受溶液中Bicine的濃度以及解離的部分與完整分子的比值共同影響。但是通常使用的,不同緩沖劑的離子強(qiáng)度是有明顯差距的。
緩沖劑離子強(qiáng)度比較:
比較常見的就是三羥Tris,它是弱電解質(zhì),Tris緩沖液中是由氨基結(jié)合水中的電離出氧根離子,體系中不含金屬陽離子,電離程度低,會(huì)對(duì)著體系pH的改變而改變解離平衡。而HEPES緩沖液除了電離出離子還加入了強(qiáng)電解質(zhì),所以相同條件下Tris緩沖液比HEPES緩沖液離子強(qiáng)度低。
同樣地,Tris體系中的其它緩沖劑,如Bis-Tris,Bis-Tris等也屬于離子強(qiáng)度相對(duì)較低的緩沖劑。
同條件下如果都是Tris的緩沖體系,如Tris-HCl緩沖液、Tris緩沖液或Tris甘氨酸緩沖液,由于是強(qiáng)電解質(zhì),或甘氨酸是弱電解質(zhì),所以Tris和Tris甘氨酸比Tris離子強(qiáng)度較低,適合要求較高較精密的生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
相比于Tris緩沖液,鹽緩沖液通常離子強(qiáng)度就比較大,所以現(xiàn)在很多生物學(xué)實(shí)驗(yàn)都用Tris系列的緩沖液代替了鹽緩沖液。當(dāng)然Tris的應(yīng)用增加也不全是離子強(qiáng)度的原因,在核酸電泳緩沖液中使用Tris緩沖液的同時(shí),還會(huì)添加氯化,增加了離子強(qiáng)度和導(dǎo)電率,加快電泳速度。
其實(shí)計(jì)算緩沖溶液離子強(qiáng)度計(jì)算挺繁瑣的,大致了解緩沖液離子強(qiáng)度大小即可,如果實(shí)驗(yàn)需要配制特定離子強(qiáng)度的緩沖液,可以用網(wǎng)站或軟件上的計(jì)算工具,采購緩沖劑原料可以找像德晟這樣的生產(chǎn)廠家。
詞條
詞條說明
一、Tris簡(jiǎn)述作為生物緩沖劑中的“扛把子”、tris當(dāng)仁不讓地居于較為重要的位置,不僅僅是因?yàn)閠ris的 PH值范圍較廣,能夠起到PH調(diào)節(jié)劑的作用。常規(guī)下是白色晶體顆粒,但是對(duì)水溶性有一定要求的,白色粉未會(huì)較加滿足其要求。酸堿指示劑PH值是7-9,還有另外的稱呼、氨丁三醇,緩血酸銨,三羥等。雖然都是同一個(gè)產(chǎn)品,但是基于不同的領(lǐng)域,不同的采購者叫法會(huì)有所不同。??二
TRIS、BICINE、HEPES緩沖液分別有什么優(yōu)缺點(diǎn)
生物緩沖液是一種能在加入少量酸或堿時(shí)防止PH值改變的溶液,PH緩沖系統(tǒng)主要用來維持生物的正常PH值,在生理環(huán)境中起到重要的作用。在生化研究實(shí)驗(yàn)中,也常常使用緩沖液來維持實(shí)驗(yàn)體系的酸堿度。由于不同實(shí)驗(yàn)中所需PH值范圍不同,也有很多生物緩沖液的種類可供選擇,并且在不同的領(lǐng)域都各有優(yōu)缺點(diǎn)。以常用的幾種生物緩沖液來舉例,我們來看看生物緩沖液都各什么優(yōu)缺點(diǎn):1、TRIS-HCL緩沖液TRIS-HCL緩沖液在
德晟作為一家酶制劑生產(chǎn)廠家,有必要提醒購買酶制劑的客戶,有幾大影響酶制劑使用效果的因素需要知道。以免購買的酶制劑產(chǎn)品因?yàn)檫@些細(xì)節(jié)處理不當(dāng)造成不必要的損失。一、PH值的影響每種酶僅在特定的pH范圍內(nèi)才表現(xiàn)出較高的活力,該pH值即是酶作用的合適pH值,酶在合適pH值表現(xiàn)就會(huì)很穩(wěn)定。若酶反應(yīng)pH值過高或過低,酶都會(huì)受到不可逆的破壞,穩(wěn)定性、活力下降,甚至失活。而且不同酶的合適pH范圍不同,偏酸性、中性、
Tris緩沖液在蛋白質(zhì)電泳和核酸瓊脂糖電泳中的應(yīng)用
Tris緩沖液是蛋白質(zhì)電泳和蛋白質(zhì)印跡的組成部分。大多數(shù)SDS-PAGE凝膠、電泳緩沖液和印跡緩沖液都用Tris緩沖。Tris緩沖液在蛋白質(zhì)電泳中的應(yīng)用大多數(shù)SDS凝膠使用不連續(xù)的Tris緩沖系統(tǒng)。濃縮凝膠具有大孔,因此較大的肽可以輕松遷移通過,通常在pH6.7–6.8下配制。在此pH值下,離子化的氯離子會(huì)迅速遷移,從而提高它們后面的pH值并產(chǎn)生一個(gè)具有低電導(dǎo)率區(qū)域的電壓梯度,這會(huì)導(dǎo)致甘氨酸(來自
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