吖啶酯在標(biāo)記核酸上的用途

    (NSP-DMAE-NHS),黃色粉末,CAS號(hào):194357-64-7,是一種重要的化學(xué)發(fā)光試劑,它的化學(xué)發(fā)光**產(chǎn)率比魯米諾高,而且酯標(biāo)記條件溫和,標(biāo)記率高,標(biāo)記后不影響分離。除此之外,酯的化學(xué)發(fā)光過程反應(yīng)迅速,本底低,在和的存在下即可發(fā)光。在氧化反應(yīng)過程中,結(jié)合物被分解,不影響游離酯的發(fā)光;另外,酯類化學(xué)發(fā)光試劑具有較好的穩(wěn)定性,易于儲(chǔ)存。

    酯除了在*測(cè)定中的應(yīng)用之外,還可以標(biāo)記寡核苷酸片段探針應(yīng)用于基因測(cè)定或微生物測(cè)定。酯化合物很適合于標(biāo)記DNA鏈以制造化學(xué)發(fā)光DNA探針。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究成果表明,許多疾病如癌癥和遺傳疾病的發(fā)生都與DNA的突變有關(guān),且許多傳染性疾病是由環(huán)境中的病毒、病菌或寄生蟲引起的,對(duì)病毒特定序列DNA的分析有利于疫情的控制。對(duì)DNA序列以及其鏈中堿基突變的檢測(cè)在基因篩選、遺傳疾病早期診斷和**、病原基因測(cè)定方面具有十分深遠(yuǎn)的意義。

    在核酸雜交分析中,制備特異性強(qiáng)、靈敏度高的標(biāo)記探針是核酸雜交分析成功的關(guān)鍵,酯衍生物可以直接標(biāo)記在核酸探針上,不需催化劑且發(fā)光**產(chǎn)率不受影響;另外,在一定條件下,未雜交的單鏈DNA上標(biāo)記的酯被水解破壞,只有雜交形成的雙鏈保護(hù)的酯才能產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光,不需分離即可監(jiān)測(cè)整個(gè)雜交過程。

    一種酯標(biāo)記核酸的方法,所述方法包括以下步驟:

    (1) DNA探針5’端、3’端保護(hù);

    (2) 酯標(biāo)記:25mM NHS酯溶解于DMSO中,配置1M HEPES緩沖液(PH8.0) ,按照摩爾比核酸探針:NHS酯=1:5的條件,加入到HEPES緩沖液中,37℃反應(yīng)1h

    (3) HPLC純化。在所述步驟(1) DNA探針5’端、3’端保護(hù)具體包括:采用三氟S-乙酯,對(duì)5’端-NH 2進(jìn)行保護(hù);采用三氟S-乙酯,對(duì)3’端-NH 2 進(jìn)行保護(hù)。

    德晟科技在12年就一直在研發(fā)化學(xué)發(fā)光試劑,研制成功后投入市場(chǎng)得到了客戶的普遍認(rèn)同。研發(fā)生產(chǎn)的酯有6種不同基團(tuán)的產(chǎn)品,化學(xué)發(fā)光試劑除了酯還有魯米諾、異魯米諾。酯系列的發(fā)光效率較高,屬于直接發(fā)光。


    湖北新德晟材料科技有限公司專注于血清分離膠,肝素,肝素,EDTA二,EDTA三,促凝,TOOS,TOPS,ADOS,ADPS,ALPS,DAOS,Tris,Tris-HCL,Bicine,Caps,Mops等

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    詞條說明

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