酯(NSP-SA-NHS)蛋白標(biāo)記的發(fā)光染料配置說明

時(shí)間：2022-01-12作者：湖北新德晟材料科技有限公司瀏覽：171

酯（NSP-SA-NHS）Cas199293-83-9及其相關(guān)化合物已被證明是非常有優(yōu)勢的化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物，其穩(wěn)定性、活性和敏感性**過了某些放射性同位素。酯能與含有一級氨基的蛋白發(fā)生反應(yīng)。在堿性條件下，NHS作為離去基團(tuán)被取代，蛋白質(zhì)與酯形成穩(wěn)定的酰胺鍵。反應(yīng)完成后，多余的鹽通過脫鹽柱除去。

在存在堿性時(shí)，標(biāo)記的蛋白不需要酶催化可自行發(fā)光。具體發(fā)光原理是在堿性溶液中，酯受到離子的進(jìn)攻，生成一個有張力的不穩(wěn)定的二氧，進(jìn)一步分解成CO2和電子激發(fā)態(tài)的酮，當(dāng)酮回到基態(tài)時(shí)發(fā)出較大吸收波長430nm的光子。

這個發(fā)光過程是十分短暫（整個過程的發(fā)生小于2秒），觸發(fā)方案必須增加內(nèi)部光度計(jì)和光子探測器；另外，也可以使用配備自動進(jìn)樣器的多功能酶標(biāo)儀進(jìn)行發(fā)光數(shù)據(jù)采集。蛋白質(zhì)，多肽，抗體，核酸都可以用本產(chǎn)品進(jìn)行標(biāo)記。酯在堿性的激發(fā)下快速發(fā)光，因此通過收集光子可以檢測到標(biāo)記化合物。

主要用于：化學(xué)發(fā)光及*分析、受體分析、核酸及多肽檢測等研究。

儲存條件： ﹣20℃，避光

運(yùn)輸條件：  2-8℃，避光

結(jié)構(gòu)式

1.配制說明

標(biāo)記緩沖液：0.2M NaHCO3  (pH=9.0)；

標(biāo)記終止緩沖液： 10% 賴氨酸  0.2M NaHCO3  (pH=9.0)溶液；

脫鹽純化緩沖液：0.1M Na2HPO4-NaH2PO4  (pH=6.5)；

酯發(fā)光液：(0.01~0.1M) NaOH+0.05% H2O2 。

2. 計(jì)算標(biāo)記所用抗體（蛋白質(zhì)）和酯的量：

通常設(shè)定摩爾比n(抗體): n(酯)=1:10~1:50，具體需根據(jù)氨基酸組分進(jìn)行摸索調(diào)整；

配制2.5mg/ml 酯-DMSO母液，注意玻璃器皿盛放并避光；

使用0.2M NaHCO3（pH=9.0） 溶液配制0.1~0.5 mg/ml 抗體反應(yīng)液 。

需要注意的是，酯標(biāo)記的蛋白可以在酸性緩沖液中4℃避光存儲（注意補(bǔ)加疊氮等防腐劑），如果儲存效果不佳，則請避光保存于-20℃或者-80℃。德晟專業(yè)生產(chǎn)化學(xué)發(fā)光試劑、化學(xué)發(fā)光底物和酶的顯色底物以及體外診斷試劑。我們還可以接受定制合成服務(wù)，歡迎前來咨詢訂購！


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