常見的幾種二氧化硫檢測方法

    醫(yī)院污水是指醫(yī)院(綜合醫(yī)院、專業(yè)病院及其它類型醫(yī)院)向自然環(huán)境或城市管道排放的污水。其水質(zhì)隨不同的醫(yī)院性質(zhì)、規(guī)模和其所在地區(qū)而異。每張病床每天排放的污水量約為200-1000L。醫(yī)院污水中所含的主要污染物為:病原體(寄生蟲卵、病原菌、病毒等)、物、漂浮及懸浮物、放射性污染物等,未經(jīng)處理的原污水中含菌總量達(dá)10^8個(gè)/mL以上。


    醫(yī)院污水檢測方法

      糞大腸菌

    A1  儀器和設(shè)備

    A1.1 高壓蒸汽滅菌器。

    A1.2 干燥滅菌箱。

    A1.3 培養(yǎng)箱:37℃。

    A1.4 恒溫水浴箱。

    A1.5 電爐。

    A1.6 天平。

    A1.7 滅菌平皿。

    A1.8 滅菌刻度吸管。

    A1.9 酒精燈

    A2  培養(yǎng)基和試劑

    A2.1 乳糖膽鹽培養(yǎng)液

    A2.1.1成分

    蛋白胨                         20g

    豬膽鹽(或牛、羊膽鹽)         5g

    乳糖                           5g

    0.4%溴甲酚紫水溶液            2.5mL

    蒸餾水                         1000mL

    A2.1.2 制法

    將蛋白胨、豬膽鹽及乳糖溶解于1000mL蒸餾水中,調(diào)整pH到7.4,加入指示劑,充分混勻,分裝于內(nèi)有倒管的試管中。115℃下滅菌20min。貯存于冷暗處備用。

    A2.2 三倍濃度乳糖膽鹽培養(yǎng)液

    A2.2.1成分

    蛋白胨                         60g

    豬膽鹽(或牛、羊膽鹽)         15g

    乳糖                           15g

    0.4%溴甲酚紫水溶液            7.5mL

    蒸餾水                         1000mL

    A2.2.2 制法

    制法同附錄A2.1.2。

    A2.3 伊紅美蘭培養(yǎng)基(EMB培養(yǎng)基)

    A2.3.1 成分

    蛋白胨                          10g

           乳糖                            10g

           磷酸氫二鉀                      2g  

           瓊脂                            20g

           2%伊紅水溶液                   20mL

           0.5%美藍(lán)水溶液                 13mL

           蒸餾水                          1000mL

    A2.3.2 制法

    將瓊脂加到900mL蒸餾水中,加熱溶解,然后加入磷酸氫二鉀和蛋白胨,混勻使溶解,再加入蒸餾水補(bǔ)足至1000mL,調(diào)整pH至7.2~7.4。趁熱用脫脂棉和砂布過濾,再加入乳糖,混勻,定量分裝于燒瓶內(nèi),115℃滅菌20min。作為儲備培養(yǎng)基貯存于冷暗處備用。

    臨用時(shí),加熱融化儲備培養(yǎng)基,待冷至60℃左右,根據(jù)燒瓶內(nèi)培養(yǎng)基的容量,加入一定量的已滅菌的2%伊紅水溶液和0.5%美藍(lán)水溶液,充分搖勻(防止產(chǎn)生氣泡)。傾注平皿備用。

    A2.4 乳糖蛋白胨培養(yǎng)液

    A2.4.1成分

    蛋白胨                         10g

                             3g

    乳糖                           5g

    氯化鈉                         5g

    1.6%溴甲酚紫乙醇溶液          1mL

    蒸餾水                         1000mL

    A2.4.2 制法

    將蛋白胨、、乳糖及氯化鈉加熱溶解于1000mL蒸餾水中,調(diào)整pH到7.2~7.4,加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1mL,充分混勻,分裝于內(nèi)有倒管的試管中。115℃下滅菌20min。貯存于冷暗處備用。

    A2.5 革蘭氏染色液

    A2.5.1 結(jié)晶紫染色液

    結(jié)晶紫                         1g

    95%乙醇溶液                   20mL

    1%草酸銨水溶液                1000mL

    將結(jié)晶紫溶于乙醇中,然后與草酸銨水溶液混合。

    A2.5.2 革蘭氏碘液

    碘                             1g

    碘化鉀                         2g

    蒸餾水                         300mL

    將碘與碘化鉀混合,加入蒸餾水少許,充分搖勻,待完全溶解,再加入蒸餾水至300mL。

    A2.5.3 脫色液

    95%乙醇。

    A2.5.4 沙黃復(fù)染液

    沙黃                           1g

    95%乙醇                       2g

    蒸餾水                         90mL

    將沙黃溶于95%乙醇中,然后用蒸餾水稀釋。

    A2.6 染色法

    染色的基本步驟為:1)涂片:在載玻片上滴加一滴生理鹽水,用滅菌的接種環(huán)取菌落少許,與生理鹽水混勻,涂布成薄膜;2)干燥:在室溫中使自然干燥;3)固定:將涂片迅速通過火焰2~3次,以載玻片反面接觸皮膚,熱而不燙為度;4)染色:滴加結(jié)晶紫染色液,染色1min,水洗;5)媒染:滴加革蘭氏碘液,作用1min,水洗;6)脫色:滴加95%乙醇脫色,約30s,水洗;7)復(fù)染:滴加復(fù)染液,復(fù)染1min,水洗。

    革蘭氏陽性菌染色后呈紫色,革蘭氏陰性菌染色后呈紅色。

    注:亦可用1:10稀釋的石炭酸復(fù)紅染色液作復(fù)染劑,復(fù)染時(shí)間為10s。

    A3  檢驗(yàn)程序



    山東中安生物安全檢測有限公司專注于生態(tài)環(huán)境類檢測,醫(yī)療器械類檢測,化妝品類,公共場所類等

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