因為梨樹感染病毒后,畢生帶毒,耐久損害,無法用藥劑醫(yī)治; 并且絕大多數(shù)梨樹病毒在**條件下未發(fā)現(xiàn)傳毒介體,首要經(jīng)過 嫁接感染。因而,培育無病毒母本樹,培育無病毒苗木是防治梨樹 病毒病的根本措施。培育梨無病毒母本樹的辦法首要有3種,即 熱處理脫毒、莖尖培育脫毒和莖尖培育結(jié)合熱處理脫毒。
(1)熱處理脫毒技能
①熱處理脫毒技能原理37T:?38T:高溫可以按捺病毒增殖及病毒在梨苗體內(nèi)分散,梨苗自身在該溫度條件下仍可以成長,因 此可利用病毒和寄主植物對髙溫忍耐性的差異,使植物的成長速 度追趕病毒的分散速度,得到一小部分不含病毒的新梢然后到達(dá) 脫除病毒的意圖。
②熱處理脫毒辦法春季取待脫毒種類接穗切接于盆栽實生 杜梨砧木上,翌年2月上中旬將該盆栽苗移人溫室,待苗木萌發(fā) 后,放人熱處理箱中(可設(shè)恒溫文變溫2種處理)。恒溫?zé)崽幚?,?度控制在371 士IX:,處理時刻為28?30天>變溫?zé)崽幚恚瑴囟葹? 32t和38*C每隔8小時改換1次,處理時刻為60天。處理完畢 后從該盆栽苗上剪取0. 8?1厘米嫩梢,劈接或皮下接于盆栽實生 杜梨砧木嫩梢上,套小塑料袋保濕,前1?2周遮蔭,待成活后去掉 塑料袋并移入田間進(jìn)行檢測。
因為熱處理脫毒法要求的設(shè)備條件比較簡單,脫毒操作比較 簡單,因而使用較早,也較廣泛,但該技能的脫毒功率較低。溫度 和時刻是影響熱處理脫毒法脫毒作用的兩個較首要的要素. Bhardwa丨等發(fā)現(xiàn),在熱空氣處理進(jìn)程中,溫度越高、時刻越長,脫 毒作用就越好,可是一起植物的生存率卻呈下降趨勢。因而,溫度 挑選時應(yīng)統(tǒng)籌脫毒作用和植物耐熱性。洪霓等(1995)在梨病毒脫 除研討中選用了 2種處理,一是恒溫處理,溫度控制在37°C 士 1°0?二是變溫處理,32X:和38*0每隔8小時改換一次^變溫?zé)崽? 理具有處理進(jìn)程中植株死亡率低和脫毒率較高的特色,而恒溫?zé)?處理嫩梢嫁接成活率較高。因而,在實踐使用中應(yīng)根據(jù)具體情況 挑選辦法。該法對嫩梢嫁接技能要求較高,所取嫩梢越短脫毒率 越高,但嫁接成活率亦越低,故一般嫩梢長度以0. 8?1厘米為宜。 洪霓等(1995〉研討結(jié)果表明,選用熱處理法可以脫除梨脈黃病毒、 梨環(huán)紋花葉病毒和榲梓矮化病毒,但蘋果莖溝病毒較難脫除,其脫 毒率為恒溫?zé)崽幚?7.1 %、變溫?zé)崽幚?4. 3%。
①莖尖培育脫毒技能的原理莖尖培育脫毒的原理是:植物 體內(nèi)病毒靠維管束體系移動,分生組織中沒有維管束存在,病毒只 能靠胞間連絲移動,速度很慢,難以追上成長活潑的分生組織,所 以旺盛成長的根尖、莖尖一般都無病毒或很少有病毒散布。植物 體不含病毒的部分很小,一般不追趕0. 5毫米,切取0. 5毫米以下 巨細(xì)的莖尖進(jìn)行培育才可以脫除病毒。
②莖尖培育脫毒辦法在梨樹新梢成長較快的時期(我國北 方為5月中下旬),收集成長旺盛、長2?3厘米的**梢,先用流水 沖刷5?10分鐘,去掉小葉,乙酵浸泡0.5分鐘,蒸餾水沖刷后放 入0.1%升汞中消毒5?10分鐘,無菌水浸洗3?5次,取出后在 解剖鏡下敏捷剝?nèi)?. 2?0. 5毫米巨細(xì)的莖尖,接種在MS附加 BA(0. 5?1.5 毫克/升)、IBA(0.1?0. 3 毫克/升)、GA3(0. 2?8. 5毫克/升)、瓊脂(5. 5克)及蔗糖(30克)的培育基上進(jìn)行別離 培育。培育成活后的試管苗按芽編號,經(jīng)繁衍,生根移栽或直接嫩 梢嫁接在實生砧木上后,移人田間,進(jìn)行病毒檢測。
莖尖培育脫毒較首要的影響要素是莖尖巨細(xì)。一般要求莖尖 長度小于0. 5毫米。一般切取莖尖越小,脫毒作用越好,可是莖尖 培育成活率變低。為此,現(xiàn)在多將熱處理與莖尖培育相結(jié)合,以獲 得較抱負(fù)的脫毒和分解作用。
(2) 莖尖培育結(jié)合熱處理脫毒技能
①原理熱處理與莖尖培育相結(jié)合之所以可以提髙脫毒效 果,是因為熱處理按捺了病毒繁衍分散速度,使植物自身所具有的 **區(qū)擴展,然后有利于切取較大的莖尖,提髙培育成活率和 脫毒功率。
②脫毒辦法熱處理與莖尖培育相結(jié)合的脫毒辦法有2種。
熱處理后莖尖培育《從恒溫或變溫?zé)崽幚砗蟮呐杳缟先∧凵?剝?nèi)??1. 5毫米莖尖進(jìn)行別離培育,消毒進(jìn)程和培育基聞莖尖培育脫毒。
試管苗熱處理:將待脫毒試管苗轉(zhuǎn)接后,在常溫下(25*C)繼代 培育15天,置恒溫培育箱中(32D培育1周,然后升溫至37V熱 處理20?50天,剝?nèi)?毫米莖尖培育。
(4>其他脫毒技能除上面介紹的3種脫毒技能以外,還有微 嫁接、抗病毒藥劑等脫毒技能。關(guān)于在離體條件下難于成長發(fā)育 或許不易生根的種類,在脫毒時可選用微嫁接的辦法,將分生組織 嫁接到試管中繁衍的砧木上,以得到完好的脫毒植株。將抗病毒 化學(xué)藥物,如三氮唑核苷(病毒唑)、5-二氫尿嘧啶(DHT)、雙乙酰- 二氫-5-氮尿嘧啶等,直接注射到帶病毒的植株上,或許加到植株 成長的培育基上,再切取莖尖進(jìn)行組織培育,可進(jìn)步脫毒率和成活 率,羅曉芳等(1的6)在培育基中加人病毒唑,脫除了 2種蘋果潛 隱病毒。這些辦法現(xiàn)在在梨樹脫毒中還少有使用。
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