細(xì)胞培養(yǎng)常見知識解答?

    1.液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好?還是冷凍好?

    要冷藏!因?yàn)橐后w培養(yǎng)基經(jīng)冷凍后再經(jīng)溶化時,其溶液的PH值會發(fā)生改變,溶液往往變堿,某些成分溶解也會受到影響對細(xì)胞生長不利。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中,通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個月 ~ 一年。

    2.液體培養(yǎng)基中谷氨酰胺的作用,及使用方法。

    幾乎所有的細(xì)胞對谷氨酰胺有較高的要求,細(xì)胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì),在缺少谷氨酰胺時,細(xì)胞生長不良而死亡。所以,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,應(yīng)置-20 ?C冰凍保存,用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基4 ?C 冰箱儲存兩周以上時,應(yīng)重新加入原來量的谷氨酰胺。

    3.培養(yǎng)用液pH對細(xì)胞生長的影響

    由于,大多數(shù)細(xì)胞適宜pH為7.2~7.4,偏離此范圍對細(xì)胞將產(chǎn)生有害的影響。各種細(xì)胞對pH的要求也不完全相同,原代培養(yǎng)細(xì)胞一般對pH變動耐受差,無限細(xì)胞系耐受力強(qiáng)。

    但總體來說,細(xì)胞耐酸性比耐堿性強(qiáng)一些,偏酸環(huán)境中較利于細(xì)胞生長。因此,我們在配制培養(yǎng)用液時,可把液體的pH稍微調(diào)得偏酸一些。液體在經(jīng)過0.10um或0.22um濾膜過濾時,溶液的PH

    還會向上浮動0.2左右。



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