血液冷凍干燥機

時間：2022-05-16作者：四川佐誠科技有限公司瀏覽：190

目前國內(nèi)血小板主要保存方式是22℃振蕩保存，有效期為 5d。 此外血小板還可深低溫冰凍保存， 但這種方法的保存效果和臨床療效不確切。 近年冷凍干燥技術(shù)已廣泛應用于各種生物材料的保存， 凍干制品具有常溫下保存、 性能穩(wěn)定、便于運輸?shù)奶攸c。 本研究以過期血小板為原料，探索血小板凍干再水化的條件，檢測其凍干再水化后凝血功能的變化， 為過期血小板再利用及新鮮血小板冰凍或低溫保存研究提供了依據(jù)。

血液冷凍干燥機在市場上應用而生，成功助力各大科研單位，滿足了各個客戶的實驗需求。

凍干工藝介紹：

1、 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 血小板來源 實驗組選擇體檢合格， 一周內(nèi)未服用**林等抗血小板藥物的自愿獻血者，用血細胞分離機單采富含血小板血漿，22℃振蕩保存 5d 過期；對照組選擇新鮮機小板。

1.1.2 主要試劑和溶液 海藻糖 (CH22O11·2H2O，北京經(jīng)科宏達生物技術(shù)有限公司)； 牛白蛋白(BSA，上海生工生物工程有限公司)；磷酸鹽緩沖液(PBS)； 血小板聚集誘導劑二磷酸腺苷(ADP，Sigma公司)；**酶(Sigma 公司)；膠原(Sigma 公司)；瑞斯托霉素(Sigma 公司)；CD62P-PE(Bioscience 公司)；PAC-1-FITC(BDIS 公司 )； 海藻糖加載緩沖液 ( 含50mmol/L 海藻糖，100mmol/L NaCl，10mmol/L KCl，10mmol/L EGTA，pH 為 6.8)；凍干保護劑(含 20%海藻糖 ，1% 牛白蛋白 ，9.5mmol/L HEPES，142.5mmol/L NaCl，4.8mmol/L KCl，1mmol/L Mg-Cl2)；復水溶液為 PBS 緩沖液和蒸餾水以 3:1 比例混合制成。 以上試劑和溶液均在有效期內(nèi)。

1.3 實驗方法

1.3.1 血小板的凍干保存 血小板濃縮液離心洗滌后重懸于海藻糖加載緩沖液中， 將上述懸浮液轉(zhuǎn)移進入離心管中，并用聚四氟乙稀生料帶密封，于37℃水浴中振蕩孵化 4h。 將孵化后的血小板懸浮液 800g 離心 3min。 去除上層孵化液，得到沉淀的血小板塊，加入凍干保護液打散重懸，使用血球**進行計數(shù)， 調(diào)節(jié)血小板在凍干保護液中的濃度為 1×109個/ml。 將制備好的血小板凍干懸浮液裝入特制凍干血盒中，密封充注口。 將血小板凍干懸液先以 20℃/min 的速率凍結(jié)至-40℃， 預凍 2h后，再以 1.5℃/min 對擱板升溫至-30℃，退火 0.5h，然后進入一次干燥，-38℃維持一次干燥條件 20h，zui后以 0.2℃/min 的加熱速率使隔板溫度升高至20℃，維持二次干燥條件 10h 直至凍干結(jié)束。 凍干的血小板密封保存在室溫。

1.3.2 凍干血小板的水化 將 PBS 緩沖液和蒸餾水以 3:1 的比例混合制成血小板凍干復水液，將1ml 復水液在室溫下直接加入凍干樣品瓶中，輕輕震蕩直到樣品溶解于復水溶液中。

1.3.3 檢測血小板回收率 用血球**分別對凍干前和凍干再水化后的血小板計數(shù)， 計算凍干再水化血小板回收率。凍干再水化血小板回收率(%)=凍干再水化后血小板計數(shù)/凍干前血小板計數(shù)×**。

1.3.4 檢測血小板穩(wěn)定性 凍干再水化血小板分別在室溫放置 0h、2h、4h、6h、8h 后，用血球**測定血小板回收率。

1.3.5 血小板形態(tài)及*微結(jié)構(gòu)觀察 用掃描電鏡觀察血小板的形態(tài)；分別以戊二醛固定、脫水、環(huán)氧樹脂包埋后制作*薄切片， 用透射電鏡觀察血小板*微結(jié)構(gòu)變化。

1.3.6 血小板聚集反應檢測 將凍干血小板復水后轉(zhuǎn)入離心管中進行洗滌以去除細胞外保護劑，再用新鮮冰凍血漿重懸血小板， 調(diào)整血小板濃度為(0.2~0.3)×1012/L。 用 APACT-2 型血小板**凍干再水化后血小板對四種同濃度誘導劑—凝血酶、膠原、ADP 和瑞斯托霉素的聚集反應。

1.3.7 血小板表面糖蛋白檢測 用三色流式細胞儀分別檢測凍干再水化血小板表面指標 CD62p和 PAC-1 的表達，經(jīng)凝血酶后測定 CD62p 和PAC-1 的再表達。 再表達率=凝血酶處理后表達率-血小板表達率1.3.8 統(tǒng)計分析 數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差(x±s)表示，采用 SPSS16.0 統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析處理， 組間差異比較用 t 檢驗，P<0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2、 結(jié)果

2.1 血小板回收率及穩(wěn)定性 實驗組和對照組間血小板計數(shù)有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，凍干再水化血小板回收率為 49.36%，見表 1；凍干再水化血小板穩(wěn)定性隨血小板放置時間的延長， 血小板回收率逐漸下降，見圖 1。




2.2 血小板形態(tài)及*微結(jié)構(gòu) 掃描電鏡顯示新鮮血小板透光性較強，形態(tài)呈圓形或橢圓形，邊緣光滑， 而凍干再水化血小板透光性較弱， 血小板變形，見圖 2A 和 B。 透射電鏡顯示新鮮血小板著色較深，α 顆粒、致密顆粒、過氧化酶顆粒等分散、清晰，而凍干再水化血小板著色較淺，致密顆粒及 α顆粒不夠清晰，且數(shù)目少于對照組，見圖 2C 和 D。

2.3 聚集反應 實驗組和對照組間血小板同濃度誘導劑下的zui大聚集率均有統(tǒng)計學意義 (P<0.05)，實驗組血小板對凝血酶、膠原、ADP 和瑞斯托霉素的聚集功能較對照組均出現(xiàn)下降，見表 2。




2.4 血小板表面糖蛋白 實驗組 CD62p 表達率和再表達率分別為 50.25%、94.27%，均顯著**對照組的 8.12%、78.43%(P<0.05)；凝血酶作用后 CD62p再表達率為 44.02%，顯著**對照組 70.31% (P<0.05)。 pac-1="" p="">0.05)，PAC-1 再表達率為42.75%，顯著**對照組 67.29%(P<0.05)，凝血酶作用后 PAC-1 再表達率為 38.90%，顯著**對照組 65.28%(P<0.05)，見表 3。













3、討論

血小板數(shù)目減少或功能不全所致出血性疾患的預防和治療，臨床多采用輸注血小板制劑。 血小板保存技術(shù)的缺陷是血小板過期浪費和臨床供不應求的兩難處境的主要原因，因此，研究出一種能長期、、和方便的血小板保存方法一直是國內(nèi)外輸血工作者關(guān)注的熱點和難題。




將過期的血小板再利用及血小板的凍干保存有著廣闊的應用前景。 本研究顯示凍干再水化的過期血小板回收率及穩(wěn)定性較差， 說明凍干和再水化過程對血小板功能造成一定影響， 應進一步改進凍干保存時擱板溫度，復水液組分和比例，以及增加預復水步驟。 透射電鏡下新鮮血小板著色相對較深， 可能為新鮮血小板生物活性較高或膜通透性相對較高，因而有較強吸附染料的能力。




CD62p 和 PAC-1 分別為血小板表面活化晚期標志物和活化早期的標志物， 結(jié)果顯示過期血小板對凝血酶、ADP、 膠原及瑞斯托霉素的zui大聚集率明顯小于新鮮血小板，凝血酶作用后 CD62p 和 PAC-1 的再表達率**新鮮血小板，說明過期以及凍干和再水化過程對血小板凝血功能有影響， 但凍干再水化的過期血小板仍具有一定的存活能力和功能活性， 因此選擇血小板進行冷凍干燥保存是血小板長期保存切實可行的方法， 為新鮮血小板冷凍干燥保存提供理論依據(jù)。 但對該方法保存血小板的回收率、 穩(wěn)定性以及凝血功能等還需做進一步研究與改進，以達到臨床應用的要求。




		冷凝溫度	-55℃
捕水能力	6kgkg/h	真空度	≤10Papa
凍干面積	0.36㎡m2	價格區(qū)間	面議
儀器類型	壓蓋裝置型	適用范圍	實驗室
產(chǎn)地類別	國產(chǎn)	應用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,食品,化工,生物產(chǎn)業(yè)
原位預凍	-40℃-+70℃?每層隔板溫度<1℃	電動壓蓋行程	60mm
凍干倉	方形316L材質(zhì)	外掛瓶	50ml/150ml/250ml/500ml可選
物聯(lián)網(wǎng)操控系統(tǒng)	可選配	軟件	安卓系統(tǒng)
操作界面	10寸高清智能彩色觸摸屏



四川佐誠科技有限公司專注于維信醫(yī)療高頻電離子手術(shù)治療機,醫(yī)用電動氣壓止血帶,床旁上下肢智能主被動康復機等, 歡迎致電 15882278331

• 詞條

  詞條說明

• 鼻腔沖洗器

  基本原理：?本機是利用氣體壓縮霧化原理把生理鹽水或藥物霧化后沖入鼻腔或口腔內(nèi)，達到治療和沖洗鼻腔的目的。適應癥：?本機主要用于鼻腔術(shù)前、后的沖洗治療。禁忌癥：詳細介紹操作說明：（1）將鼻腔沖洗器主機背面加水小門打開，掀開儲液罐上蓋，加入沖洗液（水、生理鹽水等）。加液后，將儲液罐上蓋蓋好，關(guān)閉加水小門。（2）接通電源并開啟電源開關(guān)，設(shè)備面板分別顯示噴霧設(shè)定時間值、強度。噴水設(shè)定時

• KDC-120HR微量高速冷凍離心機

  主要技術(shù)特性：﹥微型化設(shè)計，結(jié)構(gòu)緊湊，體積小巧﹥微電腦控制、液晶顯示?﹥采用變頻電機驅(qū)動,全鋼制結(jié)構(gòu)，不銹鋼加鋁合金嵌套離心腔，噪音低，保溫效果好?﹥轉(zhuǎn)速/離心力互設(shè)、同步顯示,運行中可隨時更改參數(shù)，*停機﹥10種升、降速率選擇,快18秒達到高轉(zhuǎn)速；10種自定義工作程序選擇﹥兩種計時模式：運行開始計時和達到設(shè)定轉(zhuǎn)速開始計時﹥采用變頻制冷壓縮機，靜態(tài)制冷溫度可到-20℃，高轉(zhuǎn)速

• KL-602 醫(yī)用微量注射泵 單通道

  簡易模式，僅需輸入注射速度即可啟動運行全封閉拉桿設(shè)計，防水防塵，*性高可以多臺組合使用的注射泵性能優(yōu)勢：1.?模具化生產(chǎn)，一致性好，精度達±2%；2.多種工作模式，多種給藥單位；3.具有?Anti-Bolus?功能，在阻塞報警發(fā)生后自動釋放壓力；4.多檔阻塞壓力報警，滿足不同藥物的壓力需求，提高臨床使用的*性；5.鍵盤鎖定功能，防止誤操作，*性較高；使用方便：1

• 醫(yī)用電動洗胃機DXW-C型全自動洗胃機

  醫(yī)用電動洗胃機DXW-C型全自動洗胃機一、技術(shù)規(guī)格：1、本機采用微電腦控制，全中文液晶顯示；2、具有自動和手動兩種洗胃模式、洗胃時，實時顯示洗胃模式、壓力、狀態(tài)、次數(shù)；3、壓力反饋控制系統(tǒng)，強力換向防堵結(jié)構(gòu)，機器無堵塞、卡死現(xiàn)象；4、壓力、液量雙重*保護，確?；颊?，有效提高救治效率。5、液量：根據(jù)需要可選擇進液量，分別為：150ml；250ml；350ml；二、主要參數(shù):1、流量?