【病毒滅活試驗】滅活病毒保存液怎樣滅活和裂解病毒

時間：2021-05-10作者：廣州市微生物研究所集團(tuán)股份有限公司瀏覽：524

滅活病毒保存液怎樣滅活和裂解病毒？
滅活保存液是病毒保存液的一種，主要用于滅活病毒以防二次感染，這種病毒保存液的特點(diǎn)是能夠快速地滅活病毒，將病毒蛋白膜衣殼降解掉，同時將病毒核酸釋放出來




滅活型病毒保存液中除了含有裂解的成分，通常還含有使蛋白變性破壞膜結(jié)構(gòu)的去污劑、生物緩沖劑還有防止核酸酶降解核酸的抑制劑，以及維持核酸結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的試劑等。裂解體系還可能加入蛋白酶，將蛋白切成小片段，促進(jìn)蛋白質(zhì)與核酸的分離。

裂解病毒的方法有很多種，一般比較常見的兩種是加熱法和濃鹽法：

濃鹽法是用高濃度的鹽可以破壞核酸與蛋白質(zhì)之間的次級鍵，使核蛋白解聯(lián)從而把病毒核酸釋放出來。通常使用鹽酸胍、異硫氰酸胍或非胍鹽裂解鹽，可以直接裂解滅活病毒，不需要加熱處理樣本，簡便快捷

加熱法是通過加熱到80℃~100℃的溫度值基礎(chǔ)上，因為一般樣本都是-70℃冷凍的，一般需要加熱5~10分鐘，這種操作比較簡單，只用一步就可以得到用于核酸PC R擴(kuò)增的模板，不需要任何離心、抽提等操作步驟，比常用的Che l e X 100提取方法和苯酚/氯仿等方法要快。這種方法雖然簡單快捷，但是提取的核酸含量會比較少。





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