菌落總數(shù)的定義是水樣在營養(yǎng)瓊脂上有氧條件下37℃培養(yǎng)48h后,所得1mL水樣所含菌落的總數(shù)。細(xì)菌總數(shù)是用來評價水質(zhì)污染程度的一個重要衛(wèi)生指標(biāo),其檢測值越高,則說明水質(zhì)被污染程度越高。Jsgfjc8788192
以下是水質(zhì)中菌落總數(shù)的檢測方法--平皿計數(shù)法
1.儀器與試劑
高壓蒸汽滅菌鍋、培養(yǎng)箱、**凈工作臺、培養(yǎng)基(營養(yǎng)瓊脂)
2.操作步驟
(1)把所有待用品(1ml刻度吸管、平皿、三角瓶、培養(yǎng)基、生理鹽水等)包扎好,放入高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi),經(jīng)103.43kPa(121℃,15lb)滅菌20min。
(2)滅菌完畢后,通過傳送窗口,把所用品放置于無菌室的**凈工作臺上,平攤開來。(無菌室需提前開啟紫外燈進(jìn)行滅菌1h,關(guān)閉紫外燈后至少1h后方可進(jìn)入)
(3)在平皿底部做好樣品標(biāo)識。
(4)在**凈工作臺上,酒精燈旁,用1ml的刻度吸管吸取1ml的試樣,注入至裝有9ml生理鹽水的試管中,混勻成1:10稀釋液。同理,用另外一支1ml刻度吸管吸取1:10稀釋液1ml,注入至裝有9ml生理鹽水的試管中,混勻,此溶液變成1:100稀釋液。
(5)分別用3支干凈的1ml刻度吸管移取原試樣、1:10稀釋液、1:100稀釋液 1ml于平皿內(nèi)。(每個稀釋梯度都做至少一個平行樣)
(6)移取15ml 45℃左右的培養(yǎng)基注入至平皿中,并立即左右平旋平皿,使得試樣與培養(yǎng)基充分混勻。同時,做一組空白對照(未加試樣,只有培養(yǎng)基)
(7)待培養(yǎng)基凝固后,翻轉(zhuǎn)平皿,使得帶有標(biāo)識的底面向上,放置于36℃±1℃的培養(yǎng)箱內(nèi)連續(xù)培養(yǎng)48h。
(8)培養(yǎng)48h后,記錄個平皿中的菌落數(shù),求出同稀釋度的平均菌落數(shù)。必要時可用放大鏡檢查,以防遺漏。
(9)實測值得報告方法
①平均菌落數(shù)在30~300間的,若只有一個稀釋度的平均菌落數(shù)符合此范圍時,則將該菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。
②若有兩個稀釋度,其生長的菌落數(shù)均在30~300之間,則視二者之比值來決定,若其比值小于2應(yīng)報告兩者的平均數(shù)。若大于2則報告其中稀釋度較小的菌落總數(shù)。若等于2亦報告其中稀釋度較小的菌落數(shù)。
③若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300,則應(yīng)按稀釋度高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。
④若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30,則應(yīng)以按稀釋度低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。
⑤若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30~300之間,則應(yīng)以*接近30或300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。
⑥若所有稀釋度的平板上均無菌落生長,則以未檢出報告之。
⑦如果所有平板上都菌落密布,不要用“多不可計”報告,而應(yīng)在稀釋度大的平板上,任意數(shù)其中2個平板1cm2中的菌落數(shù),除2求出每平方厘米內(nèi)平均菌落數(shù),乘以皿底面積63.6cm2,再乘其稀釋倍數(shù)作報告。
⑧菌落計數(shù)的報告:菌落數(shù)在100以內(nèi)時按實有數(shù)報告,大于100時,采用兩位有效數(shù)字,在兩位有效數(shù)字后面的數(shù)值,以四舍五入方法計算,為了縮短數(shù)字后面的零數(shù)也可用10的指數(shù)來表示。
詞條
詞條說明
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