HEPES 緩沖劑在細(xì)胞培養(yǎng)中的優(yōu)勢(shì)

時(shí)間：2022-01-05作者：湖北新德晟材料科技有限公司瀏覽：325

       HEPES（4-羥乙基哌嗪乙磺酸）是一種氫離子緩沖劑，pH值緩沖范圍：6.8-8.2。我們?cè)诩?xì)胞培養(yǎng)過程中，經(jīng)常少不了HEPES緩沖液。它是一種弱酸，在開放式的培養(yǎng)條件中，若加入HEPES，可防止培養(yǎng)基內(nèi)pH氧化升高，從而將PH維持在7.0左右。HEPES緩沖液的使用終濃度為10-50mmol/L，對(duì)細(xì)胞無毒性作用。一般情況下，濃度為20mmol/L的HEPES即可達(dá)到緩沖能力。既然我們常用于細(xì)胞培養(yǎng)液中，那它在細(xì)胞培養(yǎng)液中有哪些優(yōu)勢(shì)呢？

1. 大多數(shù)細(xì)胞所需pH 在 7.2-7.4，但細(xì)胞培養(yǎng)適pH值隨培養(yǎng)的細(xì)胞種類不同而不同，成纖維細(xì)胞喜歡較高pH（7.4-7.7），而傳代轉(zhuǎn)化細(xì)胞系則需要偏酸pH（7.0-7.4）。HEPES是一種非離子兩性緩沖液，其在pH7.2-7.4 范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力。其優(yōu)點(diǎn)是在開放式培養(yǎng)或細(xì)胞觀察時(shí)能維持較恒定的PH值，在這種培養(yǎng)條件下，細(xì)胞培養(yǎng)瓶的蓋子應(yīng)擰緊，以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。

2. 利用HCO3 和CO2緩沖對(duì)的培養(yǎng)液 pH值不穩(wěn)定，儲(chǔ)存一定時(shí)間后容易偏堿。如果培養(yǎng)液的 PH變化太快，就可以在培養(yǎng)液中加 HEPES緩沖液至10--25mM的終濃度;它可以長(zhǎng)時(shí)間保持恒定的PH，為細(xì)胞培養(yǎng)者們所喜愛。

3. HEPES與其他緩沖劑相比，它的分解常數(shù)隨溫度變化不大，這使HEPES緩沖液成為在低溫時(shí)可較好地保持酶的結(jié)構(gòu)和功能的緩沖液。

但值得我們注意的是，當(dāng)HEPES暴露于光線中時(shí)，會(huì)產(chǎn)生H₂O₂，這對(duì)培養(yǎng)的細(xì)胞或其它有生物活性的物體產(chǎn)生毒性，因此HEPES作為緩沖液的操作應(yīng)盡量在避光條件下進(jìn)行。

德晟生產(chǎn)的HEPES為白色晶體粉末，主含量≥99.50%，鐵離子≤5ppm，硫酸鹽≤0.05%，重金屬殘留（Pb)≤10ppm?？商峁┰囉脴悠贩勰孕信渲贸扇芤哼M(jìn)行檢測(cè)使用。


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