養(yǎng)殖場用非洲豬瘟檢測試劑盒使用方法-天合環(huán)境

    養(yǎng)殖場用非洲豬瘟檢測試劑盒使用方法-天合環(huán)境

    核酸DNA提取試劑盒(柱膜法)使用說明書

    【產(chǎn)品名稱】

    通用名稱:病毒DNA提取試劑盒

    英文名稱:Extraction Kit for Virus DNA

    【預(yù)期用途】

    本試劑盒主要用于疑似病毒等病原感染抗凝血、血淸、拭子、組織、飼料及環(huán)境中的病毒DNA的提取,純化的核酸可適用于各種常規(guī)操作及PCR試驗(yàn)。

    【試劑盒組分】

    I、試劑盒組成及貯藏條件

    名稱

    20 T

    50 T

    1、吸附柱

    20個

    50

    2、收集管

    20個

    50

    3、裂解液

    mL

    11 mL

    4、洗液I

    13 mL

    32 mL

    5,洗液II

    13 mL

    32 mL

    6.洗脫液

    1.2 mL

    3 mL

    2、 保存條件及有效期:室溫下保存,有效期12個月.

    3、 需自備材料:無水乙醇、1.5 mL無菌離心管、1.5 mL無菌離心管(長臂型)、生理鹽水、研缽、無菌

    1mL, 2OOuL、10uL槍頭、記號筆等。

    【操作步驟】

    一、樣品制備

    1、 血液樣品:抗凝血樣品置離心管中,8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,取上層血漿;非抗凝血樣品置離心 管中,待凝固后,8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,取上層血清,置于滅菌離心管中,編號待檢。

    2、 組織樣品:采集脾臟、肝臟、淋巴結(jié)、扁桃體等病變組織樣品0.1g.組織勻漿器或研缽中充分勻漿或研磨,加入1 mL生理鹽水混勻,8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,取上清于滅菌離心骨中,編號待檢。

    3、 口腔液:進(jìn)食前用拭子/口腔液采集袋或自制棉線綁紗布團(tuán)吸引動物咀嚼,收集口腔液大于 500uL, 8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,取上清于滅菌離心管中,編號待檢。

    4、 飼料:取適量研磨后的飼料(約0.2g),放入含1 mL生理鹽水或PBS(PH為7.4)緩沖液的2 mL EP 管屮,振蕩混勻,8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,取上清于滅菌離心管中,編號待檢.

    5、 灰塵:用無菌棉簽蘸取適量環(huán)境表面上的灰塵,放入含1 mL生理鹽水或PBS(PH為7.4)緩沖液的2 mL EP管中,振蕩混勻,8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,取上清于滅菌離心管中,編號待檢。

    二、DNA的提取

    1、取裂解液200uL加入無核酸酶1.5 mL離心曾屮,分別加入血漿/血清/組織液等樣品液200uL. 震蕩混勻10秒或顛倒混勻10次,室溫放置5分鐘(如果室內(nèi)溫度較低時.需放置25C水浴溫育),再加入200uL無水乙醇,顛倒混勻10秒;若樣品渾濁則先12000轉(zhuǎn)/分鐘離心1分鐘處理,取上清液,以避免堵塞柱子;

    2、 將液體轉(zhuǎn)入套有收集管的吸附柱中, 12000rpm離心1分鐘:

    3、 棄收集管液體,向吸附柱中加600uL洗液I , 12000 rpm離心1分鐘;

    4、 棄收集管液體,向吸附柱中加600uL洗液II, 12000 rpm離心I分鐘;

    5、 棄收集管液體,12000 rpm離心2分鐘,以徹底去除殘留洗液;

    6、將吸附柱轉(zhuǎn)入新的無核酸酸1.5mLEP管(長臂型)中,向柱*滴加50 uL洗脫液,靜置1分鐘, 12000 rpm離心1分鐘,EP管中液體即為病毒DNA。

    【注意事項(xiàng)】

    1、 實(shí)驗(yàn)前諾仔細(xì)閱讀本試劑盒說明書,嚴(yán)格按照操作步驟執(zhí)行.在操作過程中對時間、試劑體積等 粘確控制可以獲得好的結(jié)果。

    2, 樣本應(yīng)新鮮采集使用,或低溫運(yùn)輸儲存;

    3, 樣本具有潛在感染風(fēng)險,核酸的提取應(yīng)在核酸提取實(shí)驗(yàn)室的生物安全柜中進(jìn)行。

    4、 核酸提取冇關(guān)耗材確保高溫滅菌,提取后核酸盡快進(jìn)入下一步試驗(yàn)或冷凍保存待用。

    5, 試劑使用前應(yīng)混合均勻,試劑具有一定腐蝕性,使用時請戴手套、口罩做好防護(hù)。

    6. 低溫下裂解液出現(xiàn)結(jié)晶數(shù)屬正常現(xiàn)象,可在60°C水浴加熱助溶后使用。

    7、 實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的廢棄物應(yīng)及時收集,遠(yuǎn)離PCR實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行無害化處理。

    僅供獸醫(yī)診斷使用





    山東天合環(huán)境科技有限公司專注于氣象站廠家哪家好,小型氣象站廠家,防爆氣象站天合TH-FB01等

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