厭氧培養(yǎng)箱的操作說明

時間：2025-01-16作者：杭州川一實驗儀器有限公司瀏覽：172

厭氧培養(yǎng)箱是一種可在無氧環(huán)境下進行細(xì)菌培養(yǎng)及操作的裝置，可培養(yǎng)難生長的厭氧生物在大氣中操作時接觸氧而死亡的危險性。

1. 厭氧培養(yǎng)箱應(yīng)安放在溫差較小、操作方便的位置，應(yīng)避免陽光直曬和遠(yuǎn)離采暖設(shè)備，放置平穩(wěn);

2. 將混合氣瓶、氮氣瓶安放平穩(wěn)，并分別裝好減壓閥(含壓力表)，安置在適當(dāng)位置;

3. 接上氣路并檢查氣路，為防止漏氣，必要時可在各接管處用密封膠粘合;

一、厭氧培養(yǎng)箱操作室厭氧環(huán)境形成：

1. 按使用要求放置好必要的附件和器具，并向操作室內(nèi)放入二個無毒塑料袋;

2. 通電源開照明燈，開溫控儀，調(diào)節(jié)所需溫度及溫度;

3. 操作室內(nèi)放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑，并放入美蘭指示劑(封閉);

4. 關(guān)緊取樣室內(nèi)外門，并抽真空校驗;

5. 操作室內(nèi)次置換(氮氣置換)：

A. 先用橡皮管插入操作室內(nèi)進氣口，另一頭插入塑料袋;

B. 接通氮氣進氣路，打開氮氣控制閥1，使二只塑料袋充足氮氣，關(guān)閉閥門1，然后扎緊袋口;

C. 把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊;

D. 把塑料袋內(nèi)氮氣漸漸放于操作室內(nèi)，至全部放出。

6. 操作室二次置換(氮氣置換)重復(fù)一次充氮過程，取樣室先抽真空，并注意隨時用腳踏開關(guān)開閉排氣。

7. 操作室三次置換(混合氣體置換)：(混合氣體配比為N2 85%、H2 10%、CO2 5%)

A. 調(diào)換氣路打開混合氣閥3進氣，充氣時取樣室先抽真空，并隨時用腳踏開關(guān)開閉排氣;

B. 混合氣充滿塑料袋后，關(guān)掉混合氣閥并打開閥5，使混合氣經(jīng)過流量計，調(diào)整流量計，流量為每分鐘10ml左右;

C. 把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi);

D. 通過三次換氣后，操作室內(nèi)氣體含氧量已處于微量狀態(tài)。

8. 操作室內(nèi)打開粑粒除氧劑，接通除氧催化器電源進行催化除氧，一小時后開美蘭指示劑(美蘭安瓶)觀察其變色情況，不變色為操作室內(nèi)達到厭氧環(huán)境;

9. 開紫外線滅菌燈，室內(nèi)進行滅菌處理，滅菌時間按具體實驗自定。

2、菌種的置入和培養(yǎng)：

1. 檢查取樣室內(nèi)門并關(guān)緊之;

2. 打開取樣室外門，將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門;

3. 取樣室充氮置換三次過程：打開真空泵，先抽真空度500ml汞柱(66kPa)以上停，然后人工打開氮氣閥2進氣，使指針回復(fù)零位，關(guān)掉閥2。二次重復(fù)操作一次。三次操作時，使真空度500ml汞柱(66kPa)以上停，然后打開閥4進混合氣，使指針回復(fù)零位，后掉閥4。取樣室充氮置換三次過程結(jié)束;


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