1.百螢 新型鈣離子熒光探針Calbryte 520, AM概述
新型鈣離子熒光探針Cal-520 AM是美國AAT Bioquest生產(chǎn)的鈣離子熒光探針,Calbryte 520,Calbryte 590和Calbryte 630提供強(qiáng)大的均勻熒光測定工具,用于檢測細(xì)胞內(nèi)鈣動(dòng)員。與現(xiàn)有的鈣指示劑(如Fluo-3 AM,F(xiàn)luo-4 AM和Rhod-2 AM)相比,這些鈣敏感染料明顯亮,并提供高的信噪比,大大提高了細(xì)胞內(nèi)保留和負(fù)載效率。表達(dá)通過鈣發(fā)出信號(hào)的GPCR或鈣通道的細(xì)胞可以預(yù)裝載可以穿過細(xì)胞膜的Calbryte 520 AM,Calbryte 590 AM或Calbryte 630 AM。一旦進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),Cal520 AM,Calbryte 590 AM或Calbryte 630 AM的親脂性阻斷AM基團(tuán)被細(xì)胞內(nèi)酯酶切割,產(chǎn)生帶負(fù)電荷的熒光Calbryte 染料,留在細(xì)胞內(nèi)。它們與鈣結(jié)合后的熒光大大增強(qiáng)。當(dāng)用激動(dòng)劑刺激細(xì)胞時(shí),該受體表示細(xì)胞內(nèi)鈣的釋放,這顯著增加了Calbryte 520,Calbryte 590或Calbryte 630的熒光。高靈敏度和> 100倍熒光增強(qiáng)的特性使Calbryte 520 AM, Calbryte 590 AM或Calbryte 630 AM是測量細(xì)胞內(nèi)鈣的強(qiáng)大指標(biāo)。
除了方便的激發(fā)波長和鈣的大熒光增強(qiáng)外,Calbryte 520,Calbryte 590和Calbryte 630主要定位于細(xì)胞溶膠中,不像Rhod-2主要位于線粒體中。 此外,Calbryte 590和Calbryte 630的長Ex / Em波長使這些染料成為鈣指示劑,可與熒光蛋白(GFP)細(xì)胞系進(jìn)行多色檢測。 此外,Calbryte 520,Calbryte 590或Calbryte 630鈣測定經(jīng)過優(yōu)化,可與大多數(shù)現(xiàn)有熒光儀器兼容。 Calbryte 520可在488 nm處激發(fā),并與FITC濾光片組配合使用。 Calbryte 590經(jīng)過優(yōu)化,可在555 nm激發(fā),并與TRITC / Cy3濾光片組配合使用。 Calbryte 630經(jīng)過優(yōu)化,可在594 nm激發(fā),并與TexasRed?濾光片組配合使用。
2.百螢 新型鈣離子熒光探針Calbryte 520, AM參數(shù)
Ex(nm) | 493 |
Em(nm) | 515 |
分子量 | 1090.90 |
溶 劑 | DMSO |
存儲(chǔ)條件 | 在-15℃以下保存,避光防潮 |
3.百螢 新型鈣離子熒光探針Calbryte 520, AM適用儀器
流式細(xì)胞儀
Ex: 488nm
Em: 530/30nm
通道: FITC通道
熒光顯微鏡
Ex: FITC濾波片組
Em: FITC濾波片組
孔板: 黑色透明底板
熒光酶標(biāo)儀
Ex: 490nm
Em: 525nm
Cutoff: 515nm
孔板: 黑色透明底板
讀取模式: 底讀模式/可分液處理
詞條
詞條說明
膜電位是細(xì)胞內(nèi)部和外部之間的電壓差。膜電位允許細(xì)胞充當(dāng)電池,為嵌入膜中的各種分子裝置提供動(dòng)力。在神經(jīng)元等可電興奮的細(xì)胞中,膜電位用于在細(xì)胞的不同部分之間傳遞信號(hào)。膜中某一點(diǎn)離子通道的打開或關(guān)閉會(huì)導(dǎo)致膜電位的局部變化,從而導(dǎo)致電流流向膜中的其他點(diǎn)。離子通道已被確定為重要的藥物發(fā)現(xiàn)目標(biāo)。?由于主動(dòng)過程維持的K+ Na+和Cl-濃度梯度,細(xì)胞質(zhì)膜的跨膜電位通常為70mV(內(nèi)部為負(fù))。盡管熒光離
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